绿色木霉几丁质酶基因Tvchi cDNA的克隆、原核表达与活性分析

编号 zgly0001420373

文献类型 期刊论文

文献题名 绿色木霉几丁质酶基因Tvchi cDNA的克隆、原核表达与活性分析

作者 杨丽荣  孙虎  雷振生  赵献林  全鑫  薛保国 

作者单位 河南省农业科学院植物保护研究所/河南省农作物病虫害防治重点实验室/农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室  河南省农业科学院小麦研究中心 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 S476 

关键词 绿色木霉  几丁质酶基因  基因克隆  原核表达 

文摘内容 利用RT-PCR方法从绿木霉ZBS-6中扩增了几丁质酶基因Tvchi,序列分析表明Tvchi开放阅读框为1 293 bp,编码430个氨基酸残基,Blast分析表明,与多种木霉18家族内切几丁质酶具有较高的同源性。将该基因克隆到原核表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western印迹分析表明成功的获得了47 kD的融合蛋白。该融合蛋白经Ni-NTA柱亲和纯化,获得了纯度较高的融合蛋白Tvchi。Tvchi最适酶活温度为37℃,最适酶活pH值为6.8。表达产物对小麦全蚀病、赤霉病、纹枯病病原菌显示出较好的抑菌活性。本研究结果将为进一步研究木霉几丁质酶的应用提供了基础。