小反刍兽疫病毒N基因在昆虫细胞中的表达

编号 zgly0001400598

文献类型 期刊论文

文献题名 小反刍兽疫病毒N基因在昆虫细胞中的表达

作者 龙云凤  祝贺  杨建明  陈朝银  徐维佳  周晓黎  董俊  叶玲玲  艾军 

作者单位 昆明理工大学  云南出入境检验检疫局 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年12期

年份 2011 

分类号 S852.65 

关键词 小反刍兽疫病毒  N基因  杆状病毒表达载体  昆虫细胞  表达 

文摘内容 为了研发小反刍兽疫病毒ELISA检测试剂盒中替代全病毒的抗原物质,参照GenBank公布的小反刍兽疫疫苗株Nigeria75/1的全基因组序列(GenBank登录号:X74443),人工合成表达核蛋白的N基因开放阅读框序列,通过PCR扩增、经引物设计引入的EcoRⅠ和KpnⅠ特异性酶切位点,将N基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA,阳性重组质粒命名为pFastBacHTA-PPRV-N,测序结果显示N基因片段长度为1 578bp。将该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒Bacmid-PPRV-N,将该重组穿梭质粒在脂质体介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blot分析表明该蛋白得到表达产物,具有与抗体反应的活性,大小约为61.3ku。