改进的直接组织斑免疫测定法在植物病毒及细菌检测中的应用

编号 zgly0001130024

文献类型 期刊论文

文献题名 改进的直接组织斑免疫测定法在植物病毒及细菌检测中的应用

作者 鞠振林  朱笑梅  薛爱红  宁玉萍  蔡少华 

作者单位 中国农业科学院生物技术研究中心  中国农业科学院生物技术研究中心 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 1993年04期

年份 1993 

关键词 植物病毒  黄瓜花叶病毒  马铃薯卷叶病毒  烟草花叶病毒  碱性磷酸酯酶  免疫电镜法  马铃薯块茎  叶片  田间应用  病毒粒子 

文摘内容 以改进的直接组织斑免疫测定(IDDTB)的直接法,用碱性磷酸酯酶(Ap)或辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体(IgG)检测病组织中的马铃薯X病毒(PVX)、菁花叶病毒(TuMV)和马铃薯青枯细菌均获得了满意的结果。该法明显地比酶联免疫吸附测定(ELISA)和圆点免疫结合测定(DIBA)的试验程序简单、快速和准确可靠,整个检测程序可在1.5～2小时内完成。据推算其检测PVX的灵敏度相当于0.625ng/ml,可检测病叶的最低稀释度相当于1:320。以IDDTB的间接法用Ap标记的羊抗兔IgG或HRP标记的鼠抗免IgG以及兔抗病毒和细菌的多克隆抗体(IgG)检测病组织中的烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)和马铃薯环腐细菌,除耗时比上述直接法稍长外(约3小时),同样获得较满意的结果。两法均适于在田间应用。IDDTB直接法和间接法检测结果的可靠性均由免疫电镜法得到证实。上述免疫反应的结果因底物不同呈现不褪色的蓝色或深紫色,极易同健康叶片呈现的绿色相区别,并可在室温条件下长期保存。