结缕草属植物ISSR-PCR反应体系研究

编号 zgly0001361930

文献类型 期刊论文

文献题名 结缕草属植物ISSR-PCR反应体系研究

作者 王志勇  袁学军  郭海林  刘建秀  程晓丽  周志芳 

作者单位 南京农业大学园艺学院  江苏省中国科学院植物所(南京中山植物园) 

母体文献 草地学报 

年卷期 2009年01期

年份 2009 

分类号 S688.4 

关键词 结缕草  ISSR-PCR  正交试验  体系优化 

文摘内容 以SDS法提取的结缕草(Zoysia spp.)叶片DNA为模板,应用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、引物和DNA聚合酶并通过比较不同浓度的模板DNA对PCR扩增的影响,确立结缕草属植物ISSR-PCR反应的最佳体系。结果表明:各因素不同浓度对PCR反应结果有显著影响,正交设计可以用于ISSR反应体系建立,该方法建立的结缕草属植物ISSR-PCR优化反应体系为10X Buffer7、0 ng模板DNA、Mg2+2.0 mmol.L-1、dNTP 150μmol.L-1、Primer 0.3μmol.L-1、Taq DNA聚合酶1.0 U,总体积20μL;经对11份结缕草属植物进行检验,证明该体系稳定可靠。该体系的建立可为今后利用ISSR标记技术进行结缕草属遗传多样性研究、种质资源鉴定和亲缘关系分析等提供依据。