重组des-pGlu1-Brazzein基因植物表达载体的构建及对人参果的遗传转化

编号 zgly0001528909

文献类型 期刊论文

文献题名 重组des-pGlu1-Brazzein基因植物表达载体的构建及对人参果的遗传转化

作者 王克婧  张金文  张菲菲  乔岩  王志伟  卢晶 

作者单位 甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室  甘肃省干旱生境作物学重点实验室  甘肃农业大学生命科学技术学院  甘肃农业大学农学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年06期

年份 2016 

分类号 Q943.2  S668.9 

关键词 人参果  des-pGlu1-Brazzein  E8启动子  CaMV 35S启动子  植物表达载体  遗传转化 

文摘内容 本研究通过对茄科植物的E8基因的非编码区DNA序列进行亲缘关系及功能元件保守性分析,发现E8基因的非编码区包含ERE,茉莉酸和低温干旱应答等基序并存在较高的保守性,表明利用果实特异性E8启动子改善同属茄科茄属的人参果果实风味更具特异性;利用密码子偏爱性优化设计甜蛋白Brazzein,采用亚克隆技术成功获得甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因和E8启动子基因,经Blast对比均与GenBank中已报道的序列高度同源,并利用2KGQ模型分析des-pGlu1-Brazzein基因的空间结构特性;以中间载体pHANNIBAL及植物表达载体pCEPSP为基础,分别构建由E8启动子及35S启动子驱动的兼具重组甜蛋白及除草剂抗性的植物表达载体,并通过农杆菌介导法进行人参果的遗传转化,获得转化再生植株54株,经检测从中筛选出15株阳性植株,初步确定已经完成目的基因整合到人参果基因组中。