青花菜β-1，3-葡聚糖酶基因的克隆、表达分析及其植物表达载体的构建

编号 zgly0000580932

文献类型 期刊论文

文献题名 青花菜β-1，3-葡聚糖酶基因的克隆、表达分析及其植物表达载体的构建

作者 靳敏峰  侯喜林 

作者单位 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室 

母体文献 南京农业大学学报 

年卷期 2008,31(2)

页码 27-31

年份 2008 

分类号 S635.301 

关键词 青花菜  霜霉病  β-1  3-葡聚糖酶基因  植物表达载体 

文摘内容 根据其他植物的β-1，3-葡聚糖酶基因保守域序列设计简并引物，扩增出青花菜β-1，3-葡聚糖酶基因的中心区段，结合5’RACE和3’RACE技术获得该基因的5’端序列和3’端序列，经序列拼接获得1个1277bp的eDNA，在Gen—Bank中登录号为EF484879，定名为BObg。序列分析结果表明，该eDNA包含1个1056bp的开放阅读框，编码352个氨基酸，其理论上的等电点PI=7．314，相对分子质量为3．892×10^4，聚类分析显示该序列与已报道的其他植物的β-1，3-葡聚糖酶基因具有较高氨基酸序列同源性。利用未接种和接种霜霉病后不同时期的青花菜植株细胞进行半定量RT—PCR分析，结果表明，该基因在霜霉病接种后48h优势转录表达，未接种和接种后其他时期都呈低水平转录表达。利用pBI121质粒构建含35S启动子的正义表达载体，酶切图谱和PCR分析结果证明该表达载体构建成功。