辣椒胶孢炭疽菌遗传转化体系的建立

编号 zgly0001677836

文献类型 期刊论文

文献题名 辣椒胶孢炭疽菌遗传转化体系的建立

作者 曾泉  满益龙  陈岳  张鑫  张卓  李成刚  杜娇  张德咏  刘勇  谭新球 

作者单位 湖南大学研究生院隆平分院  湖南省农业科学院植物保护研究所  园艺作物病虫害综合治理湖南省重点实验室  湖南省农业科学院农业生物技术研究所 

母体文献 植物保护 

年卷期 2019年04期

年份 2019 

分类号 S436.418.11 

关键词 辣椒炭疽病菌  遗传转化  GFP  生长  致病性 

文摘内容 由辣椒胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides导致的辣椒炭疽病是辣椒生产上最为严重的真菌病害之一。本文以辣椒胶孢炭疽菌CSLL11为供试菌株,采用PEG-CaCl2介导的原生质体转化法,将含有潮霉素B抗性基因和eGFP表达基因的DNA片段成功转入辣椒胶孢炭疽菌的原生质体中,获得了稳定表达绿色荧光的转化子,从而成功建立了辣椒胶孢炭疽菌的遗传转化体系。试验结果表明,可有效筛选阳性转化子的潮霉素B浓度为500 mg/L;PCR及Southern blot结果显示,eGFP表达基因已单拷贝整合至辣椒胶孢炭疽菌转化子的基因组中;使用荧光显微镜观察第一代及继代培养后的转化子,菌丝与分生孢子均表现出强烈的绿色荧光信号,说明GFP能在转化子中稳定遗传;将转化子与野生型菌株相比,菌落形态、生长速率及致病力水平无明显差异。本研究建立了辣椒胶孢炭疽菌遗传转化体系并获得了稳定表达绿色荧光蛋白的转化子,对辣椒炭疽菌与寄主互作的研究及病害防治具有重要意义。