基因芯片技术在钩端螺旋体病传染源监测中的应用

编号 zgly0001300080

文献类型 期刊论文

文献题名 基因芯片技术在钩端螺旋体病传染源监测中的应用

作者 王元伦  唐雨德  陶开华  李越希  金慧英  张锦海 

作者单位 南京军区军事医学研究所  南京军区军事医学研究所 江苏南京210002  江苏南京210002  江苏南京210002 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2005年02期

年份 2005 

分类号 R514 

关键词 问号钩端螺旋体  基因芯片  传染源  监测 

文摘内容 为了将合成的核酸探针点样到玻片 上制备成基因芯片,先用常规PCR扩增动物 组织中钩端螺旋体特异片段,再用Cy3标记 引物,通过不对称PCR获取荧光素标记的靶 序列,然后与制备的芯片杂交,扫描仪记录结 果。同时,以PCR技术为对照,进一步观察 基因芯片技术检测动物传染源中钩端螺旋体 的特异性、敏感性及可行性。常规PCR扩增 问号钩端螺旋体阳性标本,出现单一482bp 的扩增产物,而双曲钩端螺旋体及其他螺旋 体、病原、正常动物组织均无任何DNA扩增 条带,芯片杂交结果与常规PCR方法结果一 致。用芯片和PCR对动物组织中不同浓度 钩端螺旋体的检测,最低检测浓度分别为10 条和100条钩端螺旋体,芯片检测的敏感性 高于常规PCR法。用基因芯片与PCR分别 对标本进行检测,5只人工感染的豚鼠肾、 肝、心、血等组织的检测结果均为阳性;28份 疫区野鼠肾标本阳性结果分别为8份和4 份,10份可疑病猪肾标本阳性结果分别7份 和5份;5份非疫区野鼠肾、5份正常猪肾标 本以及其他微生物的检测结果均为阴性。结 果表明,基因芯片技术可快速、灵敏、特异地 检测动物传染源中问号钩端螺旋体。