南非Ⅱ型口蹄疫间接ELISA检测方法的建立

编号 zgly0001400825

文献类型 期刊论文

文献题名 南非Ⅱ型口蹄疫间接ELISA检测方法的建立

作者 邓俊花  吴绍强  林祥梅 

作者单位 中国检验检疫科学研究院 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2011年02期

年份 2011 

分类号 S855.3 

关键词 口蹄疫病毒  南非II型口蹄疫  酶联免疫吸附试验  检测 

文摘内容 为满足口岸对南非Ⅱ型口蹄疫检测、监测的需求,在对南非Ⅱ型口蹄疫抗原表位分析及相关基因合成的基础上,进行融合蛋白pGEX-VP1~VP3的体外表达,采用柱上酶切方法制备VP1~VP3蛋白。将纯化VP1~VP3抗原包被96微孔板,分别优化抗原包被浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度,确定阴性临界值。经反复优化,建立的南非Ⅱ型间接ELISA检测方法的最佳抗原包被浓度为6.4ug/ml,血清最佳稀释度为1:200,酶标二抗最佳稀释度为1:4000,阴性临界值(OD450)为0.562。检测样品判定标准为:OD450>0.622为阳性,OD450<0.502为阴性,0.502≤OD450≤0.622为可疑。特异性试验结果表明,所建立方法与其它血清型口蹄疫间无交叉反应。南非Ⅱ型口蹄疫间接ELISA检测方法的建立为我国口岸口蹄疫检疫提供了新的查验方法。