柑橘全爪螨热激蛋白基因PcHsp90的克隆及表达模式分析

编号 zgly0001528298

文献类型 期刊论文

文献题名 柑橘全爪螨热激蛋白基因PcHsp90的克隆及表达模式分析

作者 杨丽红  豆威  蒋红波  牛金志  丁天波  王进军 

作者单位 绵阳师范学院生命科学与技术学院生态安全与保护四川省重点实验室  西南大学植物保护学院昆虫学及害虫控制工程重庆市市级重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2016年04期

年份 2016 

分类号 S436.66 

关键词 柑橘全爪螨  热激蛋白90  cDNA克隆  低温胁迫  高温胁迫  发育阶段  mRNA表达 

文摘内容 【目的】研究热激蛋白基因Hsp90在柑橘全爪螨Panonychus citri生长发育及响应高温和低温胁迫方面的作用。【方法】采用RT-PCR和RACE技术克隆柑橘全爪螨Hsp90基因cDNA全长序列;利用生物信息学软件分析该基因的序列特性;运用荧光Real-time PCR技术,分析Hsp90基因mRNA在该螨各发育阶段、高温及低温胁迫条件下的表达模式。【结果】克隆鉴定出柑橘全爪螨一条Hsp90基因的c DNA全长序列,命名为PcHsp90(Gen Bank登录号:GQ495086),全长为2 763 bp,包含2 193 bp的开放阅读框,编码730个氨基酸,编码蛋白质的理论分子量和等电点分别为83.85kDa和4.99,氨基酸序列包括Hsp90家族的5个特征基序及细胞质型Hsp90的特征序列MEEVD。系统进化分析表明,PcHsp90与朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus的Hsp90首先聚为一支,然后再与肩突硬蜱Ixodes scapularis的Hsp90聚合,说明它们较近的亲缘关系。PcHsp90在柑橘全爪螨的各发育阶段均有所表达,其中在幼螨期表达量较低,且显著低于若螨和成螨期的表达水平(P=0.015)。0~10℃低温胁迫下,Pc Hsp90的mRNA相对表达量无显著变化(P=0.492);但在35~41℃高温胁迫下,Pc Hsp90的mRNA相对表达量随胁迫温度的升高而上调,尤其是当温度升高到41℃时,mRNA相对表达量达到对照(25℃)的6.75倍,且差异达显著水平(P=0.007)。【结论】柑橘全爪螨PcHsp90不仅对该螨的生长发育具有重要作用,而且是其响应高温胁迫的重要机制之一。