一个含LoxP-FRT重组酶位点及易于操作的植物表达双元载体pYBA100

编号 zgly0001433926

文献类型 期刊论文

文献题名 一个含LoxP-FRT重组酶位点及易于操作的植物表达双元载体pYBA100

作者 闫晓红  王慧  叶艳英  曾钢  马荣才  米福贵  姚磊 

作者单位 内蒙古农业大学生态环境学院  北京市农林科学院农业生物技术研究中心  内蒙古师范大学生命科学与技术学院  江西农业大学  福建农林大学 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 Q943.2 

关键词 LoxP-FRT融合位点  植物表达双元载体  农杆菌介导  植物遗传转化  标记基因删除 

文摘内容 在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的植物遗传转化中,常常需要用到植物表达双元载体。为便于基因工程操作并能在获得转基因植物后方便将标记基因删除,我们构建了植物表达双元载体pYBA100,以满足用于生产安全转基因植物的需要。本研究通过融合PCR方法,尽可能去除所有非必需的序列,将pYBA载体最小化。pYBA载体在大肠杆菌中为多拷贝,骨架为3.69kb。我们构建的含NptⅡ植物筛选标记基因的载体pYBA100仅为5.37kb,多克隆位点为22个,方便基因工程操作。载体pYBA100的T-DNA植物筛选基因表达框两侧预留有LoxP-FRT融合位点,方便在获得转基因植物后通过Cre或FLP重组酶将植物筛选标记基因删除。pYBA100载体能于大肠杆菌和农杆菌中自我复制,并成功转化了拟南芥,符合农杆菌介导的植物转基因要求。离体删除实验结果证明,载体pYBA100能经Cre重组酶删除植物标记基因表达框。