构树ISSR反应体系的优化与建立

编号 zgly0000817802

文献类型 期刊论文

文献题名 构树ISSR反应体系的优化与建立

作者 廖声熙  崔凯  张鹏  王海英  崔永忠  袁首乾 

作者单位 中国林业科学研究院资源昆虫研究所 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2013(1)

页码 76-80

年份 2013 

分类号 S718.46 

关键词 构树  ISSR  PCR反应体系  正交试验优化 

文摘内容 利用正交试验对Taq酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg^2+浓度和模板DNA浓度5个因素进行优化, 从而建立了一套适宜构树的ISSR-PCR反应体系。在20txL的反应体系中, 各反应物的最适宜含量为: 0.07U·μL^-1TaqDNA聚合酶、0.35μmol·L^-1ISSR引物、0.3mmol·L^-1dNTPs, 2.0mmol·L^-1Mg^2+、1.2ng·μL^-1模板DNA。PCR扩增程序为: 94℃预变性5min, 94℃变性30s, 46℃退火45s, 72℃延伸2min, 40个循环。