编号
zgly0000579837
文献类型
期刊论文
文献题名
香蕉束顶病毒海南分离物DNA2编码区的克隆及抗血清的制备
作者单位
中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所
母体文献
热带作物学报
年卷期
2008,29(1)
页码
33-37
年份
2008
分类号
S668.1
S432.41
关键词
香蕉束顶病毒
BBTV
DNA2编码区
融合表达
文摘内容
利用PCR方法克隆香蕉束顶病毒海南分离物(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2编码区,将其插入到原核表达载体pGEX-6p-1谷胱苷肽-S-转移酶(GST)基因下游。所得克隆pGEX-HN-B2测序结果表明,插入的DNA2片段为267bp,且表达相位和理论上设计的完全一致。把此重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3)中,经过异丙硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后出现约33Ku融合蛋白质表达条带。为获得特异的血清,切下目的表达条带并免疫兔子。经Westem-blotting检测,获取的血清可以和表达的33Ku融合蛋白特异结合,表明已成功获得DNA2编码蛋白的血清。