高致病性PRRSV JL-04/12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析

编号 zgly0001487751

文献类型 期刊论文

文献题名 高致病性PRRSV JL-04/12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析

作者 王凤雪  刘莹  杨勇  朱洪伟  孙娜  刘杏  程世鹏  温永俊 

作者单位 中国农业科学院特产研究所/特种经济动物分子生物学重点实验室 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年10期

年份 2015 

分类号 S855.3 

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒  核衣壳蛋白  原核表达  纯化 

文摘内容 为获得高浓度、高质量的有效原核表达蛋白作为ELISA诊断抗原,通过RT-PCR法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JL-04/12株的核衣壳蛋白(N蛋白)基因并克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,转入到大肠埃希菌BL-21感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过温度和IPTG浓度的优化,进行重组蛋白的高效表达,经SDS-PAGE和Western blot对表达产物的特性进行分析,利用GST柱纯化表达蛋白,并免疫小鼠,ELISA检测其刺激产生抗体的能力-抗原的免疫原性。结果表明,0.1mmol/L的IPTG、28℃诱导4h可高效诱导重组蛋白的表达,在表达上清中目的蛋白达40%,原核表达的重组N蛋白可诱导小鼠产生抗体,抗体效价为1∶256。原核表达的N蛋白与PRRSV具有相同的抗原性。