芍药PlGA20ox基因的克隆及其在芽内休眠解除进程中的表达分析

编号 zgly0001568416

文献类型 期刊论文

文献题名 芍药PlGA20ox基因的克隆及其在芽内休眠解除进程中的表达分析

作者 韩璐璐  李俊杰  马燕  国静  郭先锋 

作者单位 山东农业大学林学院 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2017年04期

年份 2017 

分类号 Q943.2  S682.12 

关键词 芍药  PlGA20ox  克隆  亚细胞定位  表达  芽 

文摘内容 以芍药‘大富贵’芽为试材,采用RT-PCR结合c DNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆得到GA20ox基因的c DNA全长,命名为Pl GA20ox(Gen Bank登录号为KU886552)。该基因全长1 351 bp,开放阅读框1 146 bp,共编码381个氨基酸,含有高度保守的20G-Fe(I I)-Oxy蛋白结构域、Fe2+结合位点(His-247、Asp-249和His-303)和2-酮戊二酸结合位点(Arg-313和Ser-315)。Pl GA20ox蛋白分子量为43 209.1 Da,为稳定蛋白,无跨膜结构域,无信号肽,属于C19-GAoxs。氨基酸序列同源性及系统进化树分析表明:Pl GA20ox与牡丹Ps GA20ox同源性高达96%,亲缘关系最近。采用农杆菌介导法将Pl GA20ox基因于本生烟叶片中瞬时表达,观察显示:Pl GA20ox蛋白定位于细胞质中。该基因在芍药各器官中均有表达,其中,在芽中表达最高,其次花瓣,在根、萼片、叶片和茎中表达微弱。实时荧光定量PCR和高效液相色谱(HPLC)结果显示:在低温解除芍药芽内休眠进程中,Pl GA20ox表达水平呈先上升后总体下降趋势,且与内源GA3含量呈显著正相关(r=0.901*);外施赤霉素会明显增加内源GA3含量,但同时抑制Pl GA20ox的表达,说明Pl GA20ox调控GA3的合成,同时受植物体内活性GA3含量的负反馈调节。