马铃薯StERF5转录因子酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

编号 zgly0001648439

文献类型 期刊论文

文献题名 马铃薯StERF5转录因子酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

作者 徐萍萍  房宸曦  梁丽娜  王亚鹏  张宁  司怀军 

作者单位 甘肃农业大学生命科学技术学院  甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年19期

年份 2018 

分类号 S532 

关键词 马铃薯  ERF5基因  诱饵载体  酵母双杂交 

文摘内容 为了筛选与马铃薯StERF5转录因子相互作用的宿主蛋白,构建其诱饵载体,本研究利用PCR方法扩增得到马铃薯StERF5基因的编码序列,克隆至载体p MD18-T,验证正确后插入到酵母双杂交系统诱饵表达载体pGBKT7,经双酶切、PCR反应及测序验证其正确后,利用PEG/LiAc法将构建好的重组诱饵载体pGBKT7-StERF5及空载体pGBKT7分别转化到酵母Y2HGlod感受态细胞中,检测其对酵母菌株是否有毒性作用和自激活活性。结果表明:扩增得到StERF5基因,成功构建了诱饵表达载体pGBKT7-StERF5,此诱饵载体对酵母宿主细胞无毒性且不具自主激活报告基因的功能。研究结果可为进一步利用酵母双杂交技术筛选与ERF5基因互作的宿主蛋白及功能研究提供科学依据。