沙梨PpGAI3基因的分离与原核表达分析

编号 zgly0001544201

文献类型 期刊论文

文献题名 沙梨PpGAI3基因的分离与原核表达分析

作者 刘杭  王芳  李亮  王文婷  杨贺忠  马鑫瑞  吴少华  李永裕 

作者单位 福建农林大学园艺学院·福建农林大学园艺植物天然产物研究所 

母体文献 果树学报 

年卷期 2017年02期

年份 2017 

分类号 S661.2 

关键词 沙梨  休眠  DELLA蛋白  PpGAI3  原核表达 

文摘内容 【目的】分离沙梨DELLA蛋白编码基因PpGAI3,探究其蛋白在花芽休眠中的表达情况。【方法】从不同需冷量沙梨品种‘蜜雪梨’和‘黄花梨’中分离PpGAI3基因,重组到p EASY-Blunt E1表达载体中,转化BL21(DE3)宿主菌后经IPTG诱导表达,并对表达菌株进行SDS-PAGE和Western blotting检测。【结果】获得2种沙梨的PpGAI3基因,分别命名为PpGAI3mx和PpGAI3hh,Gen Bank登录号为KU954535和KX078215,其开放阅读框(ORF)为1 641 bp,编码546个氨基酸,预测其为亲水性不稳定蛋白。进化树分析表明PpGAI3mx和PpGAI3hh与白梨的亲缘关系最近;成功构建了p EASY-Blunt E1-PpGAI3原核表达载体,得到蛋白分子质量约60 ku的诱导表达产物。【结论】所得沙梨DELLA蛋白编码基因PpGAI3为植物DELLA蛋白家族中的成员,在梨花芽休眠过程中具有特异表达,且表达产物大部分以不溶性包涵体形式存在。