三角梅4,5-多巴双加氧酶基因的克隆与表达分析

编号 zgly0001577022

文献类型 期刊论文

文献题名 三角梅4,5-多巴双加氧酶基因的克隆与表达分析

作者 曹燕亭  刘姗  孙蓉  陈惠  解智杰  黄林  陈怡 

作者单位 四川农业大学生命科学学院  攀枝花学院生物与化学工程学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年01期

年份 2018 

分类号 Q943.2  S685.99 

关键词 三角梅  4  5-多巴双加氧酶  克隆  表达分析 

文摘内容 本研究通过同源克隆技术对三角梅(Bougainvillea glabra Choisy)甜菜色素合成途径中4,5-多巴双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase,DOD)基因进行了克隆分析。随后将获得的三角梅DOD基因克隆到表达载体pET30b(+)上,构建原核表达载体pET30b(+)-DOD,并转入大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。同时结合实时荧光定量PCR技术分析了遮光处理对三角梅DOD表达量和甜菜红素含量的影响。结果表明,三角梅DOD基因的cDNA序列长度为804 bp,编码268个氨基酸,GenBank登录号为KY676801。系统进化树分析显示该DOD与叶子花(Bougainvillea spectabilis Willd.)和紫茉莉(Mirabilis jalapa L.)DOD亲缘关系比较近;原核表达得到约37 k D的目的蛋白,这与预测结果相符合;实时荧光定量PCR结果表明,遮光处理使DOD表达量降低;同时,甜菜红素含量也表现为下降。这些研究结果为解析三角梅甜菜色素合成途径提供了理论依据,为三角梅花色形成机制的研究提供了基础资料。