家蚕Mod基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究

编号 zgly0001361164

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕Mod基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究

作者 周秋梅  金勇丰  张耀洲 

作者单位 浙江理工大学生物化学研究所浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室  浙江大学生命科学学院生物化学研究所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2009年04期

年份 2009 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  Mod(mdg4)基因  序列分析  原核表达  表达特征  亚细胞定位 

文摘内容 已知多数含BTB/POZ结构域的锌指蛋白对生物体的发育、分化及染色体重组等具有重要的调节作用。从已构建的家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条编码MOD(mdg4)蛋白的基因序列(GenBank登录号:DN237077)。该基因序列的ORF长1 080 bp,编码359个氨基酸残基,蛋白含有BTB保守结构域和FLYWCH保守结构域,与黑腹果蝇、冈比亚按蚊、赤拟谷盗和埃及伊蚊的MOD多序列比对,其同源性不超过40%。表达、纯化带有His标签的家蚕MOD蛋白(BmMOD),并用纯化的融合蛋白免疫新西兰兔获得多克隆抗体。实时荧光定量PCR显示BmMod基因mRNA转录水平在家蚕蛾期及5龄幼虫的卵巢最高,推测BmMod基因在家蚕生殖腺发育过程中产生一定作用。利用纯化的BmMOD蛋白多克隆抗体进行Western blotting分析也表明该蛋白在家蚕蛾期及5龄幼虫卵巢中的表达量最高,验证了BmMod在家蚕生殖腺发育中的功能。亚细胞定位结果显示BmMOD蛋白几乎完全定位于家蚕卵巢上皮细胞(BmN)的细胞核中。