马铃薯软腐病菌Erwinia carotovora subsp.carotovora 714种胞外酶基因的克隆和原核表达分析

编号 zgly0001617839

文献类型 期刊论文

文献题名 马铃薯软腐病菌Erwinia carotovora subsp.carotovora 714种胞外酶基因的克隆和原核表达分析

作者 李洋  张俊莲  白江平  徐振峰  王蒂 

作者单位 甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室-甘肃省干旱生境作物学重点实验室  甘肃农业大学农学院 

母体文献 草业科学 

年卷期 2014年04期

年份 2014 

分类号 S435.32 

关键词 马铃薯  软腐病  致病因子  克隆  原核表达 

文摘内容 以马铃薯软腐病菌Erwinia carotovora subsp.carotovora71(Ecc71)为材料,利用同源克隆技术克隆软腐病果胶酸盐裂解酶(pel)、多聚半乳糖醛酸酶(peh)、纤维素酶(cel)和蛋白酶(prt)基因,对其进行生物信息学分析,并将其克隆到原核表达载体pET28a中,将重组载体pET28a-pel、pET28a-peh、pET28a-cel和pET28a-prt转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定和酶活测定,得到了与理论推算的pel、peh、cel和prt基因表达产物分子质量相符的特异条带,并且其酶活性分别为1.672U·mL-1·h-1和0.024、112.7、16.95U·mL-1·min-1。这些结果为今后探究这4种酶之间的相互作用及马铃薯抗病性研究奠定了基础。