小鼠H1foo逆转录病毒载体的构建及表达

编号 zgly0000980828

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠H1foo逆转录病毒载体的构建及表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 许荣  张春林  宁静  李建  雷安民 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  第四军医大学西京医院老年病科 

母体文献 西北农林科技大学学报;自然科学版 

年卷期 2015(5)

页码 21-26

年份 2015 

关键词 H1foo基因  逆转录病毒载体  多潜能性干细胞 

文摘内容 【目的】构建小鼠pMX-H1foo逆转录病毒载体,并使其在小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)中异位表达,为进一步研究H1foo在重编程方面的作用奠定理论基础。【方法】根据NCBI公布的小鼠H1foo基因的mRNA序列设计引物,以小鼠卵巢组织总RNA为模板,RT-PCR扩增小鼠H1foo CDS序列,并连接到逆转录病毒载体pMX上。经双酶切鉴定和测序比对正确后,利用磷酸钙转染包装细胞plat-E的方法制备H1foo病毒液并感染MEF细胞,进一步收集感染的细胞进行半定量RT-PCR和免疫荧光染色检测,分析其在细胞中的表达情况。