百合无症病毒16kD基因的克隆、原核表达及抗血清制备

编号 zgly0001514090

文献类型 期刊论文

文献题名 百合无症病毒16kD基因的克隆、原核表达及抗血清制备

作者 冀文婕  张郑瑶  徐品三 

作者单位 大连理工大学生命科学与技术学院  大连理工大学生命与医药学院 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2016年05期

年份 2016 

分类号 S432.41 

关键词 百合  百合无症病毒  16 k D  基因克隆  原核表达  抗血清制备 

文摘内容 以感染百合无症病毒(LSV)的百合叶片为试材,克隆LSV16 k D基因,连接到原核表达载体p ET-28a(+)上。将获得的重组质粒p ET-28a(+)+16 k D转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到了高效表达的16 k D蛋白,融合蛋白分子量约为20 k D。融合蛋白经过镍柱纯化后作为抗原免疫注射小鼠,制备得到16 k D蛋白抗血清。Western blot分析显示所制备的抗血清与诱导表达的融合蛋白发生特异性反应;通过ELISA检测和RT-PCR检测百合样品,证实制备的抗血清与LSV侵染的百合叶片发生了相同的特异性反应。结果表明,目的蛋白表达成功,所制备的抗血清具有特异性,可用于LSV的快速检测、免疫组织化学以及16 k D蛋白功能研究。