刺槐幼苗中L-亮氨酸氨基转移酶的提纯和特性

编号 zgly0001112950

文献类型 期刊论文

文献题名 刺槐幼苗中L-亮氨酸氨基转移酶的提纯和特性

作者 陆宪辉 

作者单位 南京林业大学林学系 

母体文献 南京林业大学学报(自然科学版 

年卷期 1990年01期

年份 1990 

关键词 刺槐  L-亮氨酸  氨基转移酶 

文摘内容 刺槐幼苗中的L-亮氨酸氨基转移酶（EC2.6.1.6,LAT）经热处理、硫酸铵沉淀、Sephadex G-100和DEAE-纤维素柱层析被提纯61倍,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一的带。这种酶的分子量为7×104,最适pH为9.0,最适温度为60℃,它对L-亮氨酸的km为2.5mM,对α-酮戊二酸的km为3.5mM;全酶的吸收光谱在230和280nm显示两个主峰,在320和425nm显示两个小峰,透析后320和425nm的小峰基本消失;这种脱辅基酶蛋白无活力,但与100μM磷酸吡哆醛保温1～4h便可恢复活力80～100％,这表示刺槐LAT的辅基是磷酸吡哆醛;一些羰基试剂和底物类似物（二羧酸）能抑制这种酶的活力,除Co2+外,Mg2+、Mn2+、Cu2+、Hg2+、Fe3+和Al3+对酶活力都无抑制,1×10-4MHg2+和1×10-3M金属螯合剂乙二胺四乙酸（EDTA）对酶无抑制作用暗示,刺槐LAT没有对活力所需要的硫氢基和金属离子。