催化槲皮素生成异鼠李素的重组菌构建及其转化条件优化

编号 zgly0001546665

文献类型 期刊论文

文献题名 催化槲皮素生成异鼠李素的重组菌构建及其转化条件优化

作者 裴建军  董萍  徐菲  赵东霞  赵林果  丁岗  萧伟 

作者单位 南京林业大学化学工程学院江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室  江苏康缘药业股份有限公司 

母体文献 林业工程学报 

年卷期 2017年03期

年份 2017 

分类号 Q819 

关键词 槲皮素  异鼠李素  O-甲基化酶  重组菌  转化条件 

文摘内容 异鼠李素是一种黄酮类化合物,广泛存在于银杏、沙棘、旱柳和枸杞等植物中,具有多种药理作用。植物来源的O-甲基化酶能对槲皮素羟基进行甲基化,因而构建重组菌高效表达O-甲基化酶可应用于催化槲皮素生成异鼠李素。笔者对大豆来源的O-甲基化酶SOMT-9编码基因进行了密码子优化,其密码子适应指数(CAI)从优化前的0.59,提高为0.87。将优化后的基因SysOMT-9插入表达载体pGEX-2T,构建获得重组质粒pGEX-SysOMT。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),通过改变诱导温度及诱导剂浓度,实现了SOMT-9可溶性表达。在此基础上对其转化条件进行了优化,其最佳转化条件为:起始菌量OD600为10,转化温度为30℃,诱导剂IPTG用量为0.01mmol/L,助溶剂DMSO质量分数为1%,1%甘油,40μmol/L的S-腺苷基甲硫氨酸和1mmol/L槲皮素。在此条件下,重组菌在12h内,可将127mg/L的槲皮素,转化生成133mg/L异鼠李素,摩尔转化率为42%,是优化前的7.8倍。