山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立

编号 zgly0001516765

文献类型 期刊论文

文献题名 山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立

作者 刘鹤媛  周铭  岳进华  张洪杰  陈德坤 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2016年12期

年份 2016 

分类号 S827 

关键词 山羊  rIFN-γ  免疫血清  酶联免疫吸附试验 

文摘内容 为制备山羊干扰素-γ(IFN-γ)免疫血清并建立山羊IFN-γ抗体ELISA检测方法 ,以原核表达的山羊γIFN重组蛋白(rIFN-γ)为材料,免疫小鼠制备免疫血清;通过对测定不同的抗原包被浓度及包被时间,酶标抗体稀释度,免疫血清的孵育时间等条件的优化建立检测抗体效价的ELISA检测方法,并采用建立的方法测定免疫血清的抗体效价。结果显示,rIFN-γ抗原包被浓度为10μg/mL,4℃包被12h;酶标抗体稀释度为1∶5 000;免疫血清孵育时间为60min,可以得到最佳ELISA的检测结果。重复试验显示该方法变异系数(CV)在1.5%~5%之间。采用建立的方法测得免疫小鼠免疫血清效价为107。该ELISA检测方法灵敏高,稳定性好,为山羊IFN-γ抗体检测提供了技术支持。