皮毛中5种病毒基因芯片检测方法的研究

编号 zgly0001448896

文献类型 期刊论文

文献题名 皮毛中5种病毒基因芯片检测方法的研究

作者 徐超  李苗云  冯松凯 

作者单位 河南出入境检验检疫局  河南农业大学食品科学技术学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年04期

年份 2013 

分类号 S855.3 

关键词 皮毛  动物病毒  基因芯片  检测 

文摘内容 根据GenBank上蓝舌病病毒(BTV)、O型口蹄疫病毒(FMDV)、山羊痘病毒(GPV)、绵羊痘病毒(SPPV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)等5种病毒的特异性保守序列,分别设计多重荧光标记引物和相应寡核苷酸探针。使用芯片点样液稀释各探针至终浓度30μmol/L,点样制备11×11阵列芯片。核酸杂交后,建立并优化基因芯片检测方法。结果显示,使用470mL/L甲酰胺杂交液,42℃摇转杂交4h为最佳基因芯片杂交条件。建立的基因芯片检测方法与伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)等无交叉反应,检测敏感性可达20拷贝病毒核酸。制备的基因芯片稳定,保存6个月可用。对151份临床样品进行基因芯片和商业化PCR试剂盒平行检测,两者的符合率为100%。