编号
zgly0001382972
文献类型
期刊论文
文献题名
日本脑炎病毒囊膜蛋白的基因原核表达及抗原性分析
作者
张宁
金洪涛
夏志平
张瑞岩
刘雯
李勇
薛慧亮
李丹
丁壮
作者单位
吉林大学动物科技学院
解放军军事医学科学院军事兽医研究所
母体文献
动物医学进展
年卷期
2010年06期
年份
2010
分类号
S852.659.6
关键词
日本脑炎病毒
E蛋白
原核表达
抗原性
文摘内容
参照GenBank中的日本脑炎病毒序列设计一对特异性引物,采用RT-PCR法扩增E基因得到cDNA,克隆至pMD-18T载体,经测序证实后亚克隆至原核表达载体pET-28a中,转化入BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果表明,成功构建了重组质粒pET-28a/JEV E,目的蛋白主要以包涵体形式表达。Western blot检测表明,表达产物与兔抗JEV多克隆抗体呈阳性反应,在ELISA试验中,用表达出的E蛋白包被,能够很明显地区分出猪日本脑炎阴性、阳性血清。