猴源环孢子虫巢式PCR检测方法的建立

编号 zgly0001383314

文献类型 期刊论文

文献题名 猴源环孢子虫巢式PCR检测方法的建立

作者 高振永  李国清  岳彩玲  程家林  朱海波  李结 

作者单位 华南农业大学兽医学院 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2010年05期

年份 2010 

分类号 S852.723 

关键词 猴  环孢子虫  巢式PCR  临床检测 

文摘内容 环孢子虫是一类可引起人和动物腹泻的重要寄生性原虫。为建立猴源环孢子虫的巢式PCR检测方法,根据该环孢子虫18S rDNA基因序列,设计一对保守引物N18SA/N18SS和一对特异性引物CYJS/CYJA,通过阳性质粒摸索该检测方法的最佳反应条件,进行特异性和敏感性试验,并应用该方法对87份猴粪样本进行了临床检测。结果显示该巢式PCR能特异性地扩增出猴源环孢子虫目的片段,与微小隐孢子虫、阿米巴原虫等8种DNA无交叉反应,最低能检测0.2 fg的阳性质粒DNA,对临床样本的检出率比传统方法(饱和蔗糖漂浮法和改良抗酸染色法)提高2.3%~3.4%。可见,该巢式PCR方法具有较高的特异性和敏感性,对于环孢子虫病的诊断和分子流行病学调查具有重要的应用价值。