奶牛乳腺上皮细胞系的培养与鉴定

编号 zgly0001487536

文献类型 期刊论文

文献题名 奶牛乳腺上皮细胞系的培养与鉴定

作者 詹康  贡笑笑  左晓昕  陈银银  占今舜  赵国琦 

作者单位 扬州大学动物科学与技术学院 

母体文献 动物营养学报 

年卷期 2015年08期

年份 2015 

分类号 S823 

关键词 奶牛乳腺上皮细胞  乳房炎  功能性  核型分析 

文摘内容 本试验旨在培养功能性奶牛乳腺上皮细胞系,为奶牛泌乳调控和奶牛乳房炎发病机制研究提供功能性的细胞模型。采用组织块细胞培养法来分离纯化并鉴定奶牛乳腺上皮细胞;采用有限稀释法单克隆奶牛乳腺上皮细胞;采用噻唑蓝(MTT)法来分析奶牛乳腺上皮细胞的生长曲线是否为正常的S形;观察细胞角蛋白18免疫荧光来证明所培养的细胞为上皮型;选择培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞进行染色体核型分析。结果表明:1)利用组织块细胞分离法能够成功获得奶牛乳腺上皮细胞并传至20代。2)培养5~6 d成纤维细胞迅速增殖且周围分裂出少量的上皮细胞。培养8 d奶牛乳腺上皮细胞迅速增殖,形成岛屿状集落,呈单层鹅卵石和铺路石形态生长。3)奶牛乳腺上皮细胞角蛋白18鉴定为阳性。4)培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞染色体数为60条,具有正常的细胞二倍体核型。综上所述,采用组织块培养细胞能够获得具有稳定性、功能性的奶牛乳腺上皮细胞,但不是永生化细胞。