家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)染色体DNA的分离纯化

编号 zgly0001422219

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)染色体DNA的分离纯化

作者 黄为  马振刚  张时恒  潘国庆  李田  周泽扬 

作者单位 西南大学  家蚕基因组生物学国家重点实验室  重庆师范大学动物生物学重点实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S884.21 

关键词 家蚕微孢子虫  分子核型  染色体DNA  纯化  玻璃奶胶回收试剂盒 

文摘内容 为了获取可供家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)单染色体测序的基础材料,通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术分离家蚕微孢子虫CQ1株系的染色体DNA,随后切取含有目的染色体DNA条带的琼脂糖胶块,分别利用电洗脱法、柱式胶回收试剂盒法及玻璃奶胶回收试剂盒法进行染色体DNA的分离纯化实验。结果显示3种方法均能回收到目的染色体DNA,但分离纯化的效率和样品质量存在差异:电洗脱法对胶块中的DNA损失较大,回收的染色体DNA含量低,而柱式胶回收试剂盒回收的染色体DNA断裂严重,因此这2种方法获得的样品质量均达不到染色体建库测序的要求;通过优化后的玻璃奶胶回收试剂盒法获得的染色体DNA相对完整且污染较少,质量检验分析133μL样品中的DNA质量浓度为8.495 ng/μL(DNA总量1.13μg),达到后续构建染色体测序文库的要求。玻璃奶胶回收试剂盒法不仅适用于家蚕微孢子虫染色体DNA的分离纯化,也可供基因组较小的物种制备单染色体建库测序材料参考。