香石竹坏死斑点病毒的鉴定与检测

编号 zgly0000648924

文献类型 期刊论文

文献题名 香石竹坏死斑点病毒的鉴定与检测

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 赵珊  王继华  王丽花  杨秀梅 

作者单位 云南省植物病理重点实验室  云南省农业科学院农业部花卉产品质检中心 

母体文献 西南农业学报 

年卷期 2010,23(1)

页码 103-106

年份 2010 

分类号 S636.9 

关键词 香石竹坏死斑点病毒  RT-PCR  特异引物  筒并引物 

文摘内容 调查表明云南省昆明市团结乡香石竹普遍发生病毒病。电镜负染检测采自团结乡香石竹病毒病病样, 病叶汁液中观察到弯曲长线型的病毒粒体, 长度约1000—1600am, 直径约12nm。对这些病样的叶片进行间接ELISA检测, 所有样品与香石竹坏死斑点病毒抗血清都呈阳性反应。按照报道的长线形病毒属筒并引物合成引物, 采用RT-PCR法对血清反应呈阳性的香石竹总RNA扩增了1059 ntzHSP70基因部分编码序列。将其克隆到pMD18-T载体上, 并进行序列分析。根据测序结果设计引物建立RT-PCR扩增检测方法并测定其灵敏度。结果表明, 使用筒并引物和新设计的引物均能从CNFV感病香石竹组织中扩增出与预期大小一致的目标片段, 而健康组织无此扩增产物。灵敏性测定结果表明该特异性引物RT—PCR可从稀释10^6植物总RNA中检测出病毒。