柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达

编号 zgly0001495196

文献类型 期刊论文

文献题名 柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达

作者 曹利利  姚新华  郭衍冰  王英贺  任科研  魏峰  苑淑贤 

作者单位 吉林省畜牧兽医科学研究院  吉林农业大学生命科学学院  吉林省畜牧兽医总站 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年09期

年份 2015 

分类号 S858.31 

关键词 柔嫩艾美耳球虫  SAG2基因  卡介苗  表达 

文摘内容 为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体。双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-分支杆菌整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV361-SAG2,经电穿孔转染到卡介苗中,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建了重组质粒pMD18-T-SAG2和pMV361-SAG2,SAG2在卡介苗中高效表达,表达产物能够被柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别,表明具有良好的免疫原性,为下一步重组卡介苗对鸡球虫病的免疫保护研究奠定了基础。