猕猴桃ACC氧化酶反义基因转化猕猴桃的研究

编号 zgly0000809591

文献类型 期刊论文

文献题名 猕猴桃ACC氧化酶反义基因转化猕猴桃的研究

学科分类 220.35;野生动物保护与管理

作者 田宏现  苑平  王曼玲  刘艺  李菁  夏新界  谭晓风 

作者单位 中南林业科技大学  吉首大学  中国科学院亚热带农业生态研究所 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2012(11)

页码 115-121

年份 2012 

分类号 S759.3 

关键词 猕猴桃  ACC氧化酶  农杆菌介导  反义表达载体 

文摘内容 为建立猕猴桃ACC氧化酶反义基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃, 从海沃德猕猴桃(ActinidiachinensisPlanch.var.deliciosa‘Hayward’)叶片中提取总RNA, 反转录合成cDNA第一链, 并以此为模板, 扩增得到ACC氧化酶(ACO)基因片段约1kb, 经限制性内切酶图谱分析, 组建亚克隆并进行测序, 其开放阅读框长957bp, 编码319个氨基酸, 与其他已公布的ACC氧化酶cDNA的核苷酸(AB003514.1)及氨基酸序列(BAA21541.1)同源率分别高达94.0%和95.6%, 证明所克隆的cDNA序列的准确性。构建该基因的反义表达载体, 并通过农杆菌介导的方法成功转化米良一号猕猴桃(ActinidiadeliciosaCV.Miliang-1), 得到再生苗。取14株经PCR检测, 其中10株检测到ACC氧化酶基因目的条带, 阳性植株占71.4%。实时荧光定量PCR分析结果显示, 再生苗ACO基因的表达量低于野生型58%～81%。