甘蓝枯萎病菌REMI转化体系的建立

编号 zgly0001445662

文献类型 期刊论文

文献题名 甘蓝枯萎病菌REMI转化体系的建立

作者 冯建海  张玮  李兴红  燕继晔  黄金光 

作者单位 青岛农业大学农学与植物保护学院  北京市农林科学院植物保护环境保护研究所  山东省植物病虫害综合防控重点实验室 

母体文献 植物保护 

年卷期 2013年03期

年份 2013 

分类号 S436.35 

关键词 甘蓝枯萎病菌  REMI  转化子库 

文摘内容 建立高效、稳定的甘蓝枯萎病菌REMI转化体系,为进一步获得特定表型突变体及基因功能研究建立技术储备。利用REMI(restriction enzyme mediate intergration)转化方法,将线性化的含有潮霉素抗性基因的pUCAT-PH质粒转化甘蓝枯萎病菌A6菌株的原生质体,摸索获得转化子最适的潮霉素筛选浓度以及不同限制性内切酶和酶量对转化效率的影响;利用PCR(polymerase chain reaction)技术对潮霉素抗性转化子进行验证。结果表明转化子的最适潮霉素筛选浓度为50μg/mL;转化效率较高的限制性内切酶为HindⅢ,并且转化效率最高时的酶量为20U。利用该转化体系构建了含1 050个转化子的甘蓝枯萎病菌转化子库,对转化子进行Southern验证,证明该转化体系是可行的。