家蚕蛋白质双向电泳的样品制备方法

编号 zgly0001265954

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕蛋白质双向电泳的样品制备方法

作者 钟伯雄  颜海燕  沈飞英  李建科  周丽 

作者单位 浙江大学动物科学学院蚕蜂分子生物学实验室  浙江大学动物科学学院蚕蜂分子生物学实验室 杭州310029  杭州310029  杭州310029 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2003年04期

年份 2003 

分类号 O629 

关键词 家蚕  双向电泳  样品制备方法  蛋白质抽提缓冲液  蛋白质溶解缓冲液 

文摘内容 进行蛋白质组研究的关键是要尽可能完整地获得一个基因组在一个生物体或一个组织器官的特定时期表达的蛋白质的种类和数量 ,双向电泳技术是分离组织和器官蛋白质的核心技术 ,而蛋白质样品的制备是双向电泳的基础。以家蚕胚胎、中肠、皮肤、丝腺等组织器官为材料 ,采用磷酸缓冲液或Tris HCl缓冲液抽提蛋白质样品 ,用 6种不同的蛋白质溶解缓冲液溶解蛋白质 ,经蛋白质双向电泳和蛋白质图像软件分析 ,结果表明用磷酸缓冲液抽提、蛋白质溶解缓冲液E溶解是制备家蚕蛋白质双向电泳样品的较好方法。蛋白质磷酸抽提缓冲液 (PBS)的组成为 :32 5mmol/LK2 HPO4,2 6mmol/LKH2 PO4,4 0 0mmol/LNaCl,pH 7 6。蛋白质样品溶解缓冲液E的组成为 :8mol/L尿素 ,2mol/L硫尿 ,4 %CHAPS ,2 0mmol/LTrisbase,30mmol/LDTE ,2 %Pharmalyte(pH 3～ 10 )。