应用猪繁殖与呼吸综合征核酸标准物质比较5种核酸提取试剂盒

编号 zgly0001723684

文献类型 期刊论文

文献题名 应用猪繁殖与呼吸综合征核酸标准物质比较5种核酸提取试剂盒

作者 徐琦  韩焘  原霖  张硕  李晓霞  刘颖昳  毕一鸣  顾小雪 

作者单位 中国动物疫病预防控制中心 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2020年12期

年份 2020 

分类号 S858.28 

关键词 猪繁殖与呼吸综合征  核酸提取  标准物质  数字PCR 

文摘内容 为比较不同核酸提取试剂盒对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸的提取效率,使用国家标准物质猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲经典株核酸标准物质作为模拟样品,分别使用试剂盒A、B、C(磁珠法)以及试剂盒D、E(柱式法)等5种核酸提取试剂盒进行核酸提取,然后通过荧光RT-PCR和数字RT-PCR方法评估提取效率,并分析不同基质对提取效率的影响。结果显示:5种试剂盒均能有效提取PRRSV RNA,其中磁珠法的提取效率高于柱式法;试剂盒B和C对PRRSV RNA的提取效率较高;基质会对提取效率造成影响,精液和抗凝血对试剂盒提取效率的影响较大。综上,试剂盒B、C均可适用于猪繁殖与呼吸综合征临床样品的核酸提取。实际操作中,应根据实验室条件、样品数量、样品类型和时间要求等因素,选择应用合适的提取试剂盒。