牛新孢子虫二温式PCR检测方法的建立与应用

编号 zgly0001400511

文献类型 期刊论文

文献题名 牛新孢子虫二温式PCR检测方法的建立与应用

作者 季新成  王文  牛国辉  郑培  张玲 

作者单位 新疆出入境检验检疫局  新疆动物防疫监督总站  新疆计量测试研究院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年08期

年份 2011 

分类号 S855.9 

关键词 新孢子虫  二温式PCR  均匀设计  牛 

文摘内容 根据已发表的犬新孢子虫种属特异性基因片段Nc-5基因序列设计合成一对特异性引物,采用均匀设计方法对引物浓度、Mg2+浓度、dNTP、Taq酶和退火温度进行了优化,建立了检测牛新孢子虫的二温式PCR方法。该方法对牛新孢子虫DNA的检测灵敏度为23.5 fg/反应。应用该方法对50份全血和8份流产胎儿样本进行了检测,有3份全血和1份流产胎儿样本为阳性。与三步法PCR相比较,该二温式PCR方法检测时间缩短了30 min,且方法具有快速、灵敏、准确、特异等优点,可用来对牛新孢子虫病的检测。