编号
zgly0000707402
文献类型
期刊论文
文献题名
早酥梨病程相关基因非表达子1基因(NPR1)克隆及原核表达
学科分类
220.1520;林木遗传学
作者单位
西北农林科技大学园艺学院
农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室
母体文献
农业生物技术学报
年卷期
2010(1)
页码
18-23
年份
2010
分类号
Q943
关键词
早酥梨
病程相关基因非表达子1基因(NPR1)
克隆
原核表达
文摘内容
本研究以成年早酥梨(Pyrus bretschneideri cv.Zaosu)叶片为材料,通过RT-PCR克隆早酥梨病程相关基因非表达子1基因(NPR1)并获得其全长序列1771bp,开放阅读框为1761bp,编码586个氨基酸(GenBank登录号: FJ769372)。利用NCBI/Blastp和ClustalX软件进行相似性分析表明,目的基因编码蛋白质序列与日本梨(P.pyrifolia)、秋子梨(P.ussuriensis)、苹果(Malus×domestica)、烟草(Nicotiana tabacum)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NPR1蛋白相似性分别为99%、98%、98%、67%和59%。将其连接pGEX-4T-1原核表达载体并转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,经IPTG诱导表达获得大小约为91kD的目的融合蛋白,融合蛋白主要以包涵体形式表达,表达量约占总蛋白17%。