不同温度胁迫下瓜实蝇RT-qPCR内参基因筛选

编号 zgly0001647626

文献类型 期刊论文

文献题名 不同温度胁迫下瓜实蝇RT-qPCR内参基因筛选

作者 王凤英  杨朗  黎柳锋  廖世纯  廖仁昭  姜建军 

作者单位 广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室 

母体文献 环境昆虫学报 

年卷期 2018年05期

年份 2018 

分类号 S433 

关键词 瓜实蝇  内参基因  温度胁迫  RT-qPCR 

文摘内容 特定条件下稳定表达内参基因的筛选是利用实时荧光定量PCR研究基因表达的关键基础。本研究以不同温度胁迫后后的瓜实蝇Bactrocera cucurbitae 2龄幼虫、雌虫和雄虫为试验材料,对其9个候选内参基因表达进行了RT-qPCR分析,并利用ge Norm、Norm Finder、Best Keeper和Ref Finder 4款软件分析各候选内参基因在3种虫态中的表达稳定性。结果表明,18S rRNA基因Ct值(≤5)较小,不适合作为内参基因使用,其它8个内参基因在瓜实蝇2龄幼虫中的稳定性排序为Rp L32> RPS13> TBP>β-tubulin> TUBE> Actin2> G6PDH> Actin3。雌虫表达稳定性由高到低为:RPS13> Rp L32>β-tubulin> TBP> TUBE> Actin2> Actin3> G6PDH。雄虫表达稳定性为Rp L32> RPS13>β-tubulin> TBP> TUBE> Actin2> G6PDH> Actin3。ge Norm软件分析各个虫态内参基因最佳组合均为2个。RPS13和Rp L32组合可作为瓜实蝇不同虫态下温度胁迫后的内参基因。