基于PEG介导原生质体转化构建粉红聚端孢荧光标记

编号 zgly0001660504

文献类型 期刊论文

文献题名 基于PEG介导原生质体转化构建粉红聚端孢荧光标记

作者 戴蓬博  梁晓飞  张荣  孙广宇 

作者单位 西北农林科技大学植物保护学院 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2019年01期

年份 2019 

分类号 S432.44 

关键词 遗传转化  绿色荧光蛋白  原生质体制备  苹果  心腐病 

文摘内容 粉红聚端孢是多种植物的重要病原菌。本研究通过酶解粉红聚端孢幼嫩菌丝细胞壁获得原生质体,用PEG介导原生质体转化将携带GFP基因和博来霉素抗性基因的外源DNA随机插入粉红聚端孢基因组,共获得博来霉素抗性菌株90株,转化效率达18个/μg。选取22株转化子荧光观察,发现均可表达荧光,菌株间荧光强度不同,其中10株转化子荧光表达较强。与野生型相比,突变菌株TR45的菌落生长、产孢量和致病力等生物学特性均未改变,在不含博来霉素的培养皿中继代培养10代荧光仍能稳定表达。本研究构建的高效原生质体制备和PEG介导粉红聚端孢遗传转化方法,可用于该菌基因功能研究,绿色荧光标记菌株可用于病菌侵入、田间监测、侵染循环等发生规律研究。