细菌blaNDM-1基因PCR检测方法的建立及应用

编号 zgly0001448814

文献类型 期刊论文

文献题名 细菌blaNDM-1基因PCR检测方法的建立及应用

作者 温肖会  翟少伦  丘婷  吕殿红  贾春玲  袁洁  黄忠  周秀蓉  魏文康 

作者单位 广东省农业科学院动物卫生研究所  华南农业大学兽医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年12期

年份 2013 

分类号 S854.43 

关键词 blaNDM-1基因  耐药细菌  聚合酶链反应 

文摘内容 为了调查养殖场和农贸市场中的耐药细菌是否携带blaNDM-1基因,根据GenBank已公布的blaNDM-1基因序列设计PCR引物,优化PCR反应体系和反应条件,建立了blaNDM-1基因的PCR检测方法,以人工合成的blaNDM-1基因作为阳性质控品,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌等4株标准菌株为阴性对照,验证耐药细菌blaNDM-1基因PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性,并对229株大肠埃希菌分离株和31株链球菌分离株进行检测。结果表明,blaNDM-1基因PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验均成立,该方法扩增的目的基因片段为241bp,能检出的最小基因组DNA浓度为9.18×10-7μg/μL;229株大肠埃希菌分离株和31株链球菌分离株blaNDM-1基因PCR检测结果均没有出现目的条带,表明从广东省部分地区分离到的细菌分离株中没有携带blaNDM-1基因。该方法可作为耐药细菌blaNDM-1基因的早期检测、快速筛查手段在兽医临床耐药细菌检测中应用。