编号
zgly0000661404
文献类型
期刊论文
文献题名
油茶SRAP-PCR反应体系的建立和优化
学科分类
220.45;经济林学
作者单位
北京林业大学生物科学与技术学院
华南农业大学林学院
母体文献
基因组学与应用生物学
年卷期
2010,29(6)
页码
1192-1199
年份
2010
分类号
S823
关键词
油茶
SRAP-PCR
反应体系
正交设计
文摘内容
为了建立油茶SRAP-PCR扩增体系,本研究使用单因素试验设计,对反应体系的Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物浓度5个主要影响因子各设10个不同的水平梯度,筛选出适宜的因子范围;在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计,对影响油茶SRAP-PCR反应体系的5个因素在4水平上进行优化,建立了油茶SRAP-PCR最佳反应体系,即25μL体积中包含模板DNA30ng,Mg2+2.8mmol/L,引物0.44μmol/L,dNTP0.2mmol/L和Taq酶1.0U。该SRAP-PCR体系的建立为油茶种质资源遗传多样性分析、品种鉴定及指纹图谱构建等研究提供了一个标准化的程序。