用正交设计法优化臭椿SRAP-PCR反应体系

编号 zgly0000777968

文献类型 期刊论文

文献题名 用正交设计法优化臭椿SRAP-PCR反应体系

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郭旭琴  游庆方  汪贵斌  曹福亮  黄广远  仓湘斐  章霞 

作者单位 南京林业大学森林资源与环境学院  姜堰市林业局 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2012,40(5)

页码 2570-2573

年份 2012 

分类号 S792.32 S718.43 

关键词 臭椿  SRAP-PCR  体系优化  正交设计 

文摘内容 [目的]确定臭椿SRAP-PCR反应条件,为进一步研究臭椿SRAP分子标记提供依据。[方法]以新疆吐鲁番3号和江西臭椿叶片DNA为材料,利用引物组合EM1-EM8进行SRAP-PCR反应的L16(45)正交试验,建立了臭椿SRAP-PCR反应体系,新复极差法对体系进行方差分析,并对体系的稳定性进行检测。[结果]确定臭椿SRAP-PCR反应体系为: 模板DNA 2.5 ng/μl、Mg2+1.75 mmol/μl、dNTPs0.3 mmol/μl、Taq酶0.3 U/μl、引物0.6μmol/μl、10×PCR Buffer 2.5μl;该体系稳定,适用于臭椿的SRAP反应。[结论]该试验优化的SRAP反应体系,将为臭椿种质资源多样性评价、分子标记,以及遗传连锁图谱构建奠定基础。