犬细小病毒SH14株VP2基因原核表达及免疫原性分析

编号 zgly0001517087

文献类型 期刊论文

文献题名 犬细小病毒SH14株VP2基因原核表达及免疫原性分析

作者 唐井玉  李传峰  宫晓华  李琦  丁明洋  陈宗艳  王桂军  刘光清 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所  安徽农业大学动物科技学院  甘肃农业大学 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2016年01期

年份 2016 

分类号 S852.655 

关键词 犬细小病毒  VP2基因  原核表达  免疫原性 

文摘内容 根据犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)SH14株基因序列设计引物,采用PCR方法扩增CPV VP2基因,经Bam HⅠ、XhoⅠ双酶切后,将其克隆至p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-VP2,经酶切鉴定和测序验证正确后转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,应用SDS-PAGE法检测蛋白的表达。然后,使用纯化的重组VP2蛋白制备其兔源多克隆抗体,分别应用蛋白免疫印迹、间接免疫荧光检测该抗体的免疫原性。结果表明,p GEX-4T-VP2能在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达,所制备的兔抗CPV-VP2抗体能与重组蛋白和病毒蛋白发生特异性反应。本研究为研发CPV亚单位疫苗、检测技术及致病机理研究等奠定了物质基础。