应用电击法获得转MT基因平菇(英文)

编号 zgly0001257449

文献类型 期刊论文

文献题名 应用电击法获得转MT基因平菇(英文)

作者 张竞  聂思惟  单龙  茹炳根 

作者单位 北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室  北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室 北京100871  北京100871  北京100871 

母体文献 Acta Botanica Sinica 

年卷期 2002年12期

年份 2002 

分类号 Q943.2 

关键词 电击法  原生质体  转基因平菇 

文摘内容 将MT基因用电击法转化平菇 (Pleurotusostreatus) ,MT基因表达蛋白与金属离子结合而形成络合物 ,用Zn诱导 ,转基因平菇能富集Zn ,可为缺Zn的人群补充Zn ,使平菇成为一种保健和治疗的食品或蔬菜。原生质体制备浓度为 6 .74 5× 10 6个 /mL。原生质体电击转化率为 0 .0 1%。PCR检测 ,2 0 0bp处有MT基因条带。蛋白检测 :转基因MT平菇ELISA检测阳性 ,表达率为 0 .6 %～ 0 .8%。SDS_PAGE显示有表达条带。Westernblot显示有阳性条带。抗ZnSO4结果 :野生型平菇抗ZnSO4浓度为 1.0mmol/L ,1.2mmol/L开始受抑制 ,转基因平菇抗ZnSO4浓度为 1.5mmol/L ,2 .0mmol/L开始受抑制。出菇试验结果表明 ,在米糠与锯沫比为 1∶3的培养基上生长 ,在米糠与锯沫比为1∶4的培养基上不生长。 2 4d菌丝可在广口瓶中长满 ,用于子实体培养。