重度感染家蚕微孢子虫的家蚕丝腺cDNA文库构建及EST测序分析

编号 zgly0001371087

文献类型 期刊论文

文献题名 重度感染家蚕微孢子虫的家蚕丝腺cDNA文库构建及EST测序分析

作者 李田  潘国庆  党晓群  周泽扬 

作者单位 西南大学蚕学与系统生物学研究所  重庆师范大学生命科学学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2009年02期

年份 2009 

分类号 S884.21 

关键词 家蚕微孢子虫  家蚕丝腺  感染  cDNA文库  EST 

文摘内容 用家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)感染家蚕品种大造的3龄幼虫,于感染后第10天选择有Nb重度感染特征的家蚕丝腺组织无菌操作提取RNA,构建Nb和家蚕丝腺混合样品cDNA文库(文库滴度≥1.6×106PFU/mL)。对文库进行测序,获得EST序列5 026条,其中家蚕丝腺EST3 901条、家蚕微孢子虫EST970条。拼接后,分别获得家蚕丝腺和Nb的单一EST(unique EST)563和383条。对EST和unique EST进行分析发现,感染后第10天家蚕丝腺中Nb的组蛋白、细胞分裂激酶等与孢子分裂增殖相关的基因表达水平较高,一些可能与Nb侵染或寄生适应相关的基因,如Nb孢壁蛋白、极丝蛋白、转运体蛋白等基因亦在此时期较高水平表达,尤其是此期间有相对高水平的组蛋白脱乙酰基酶基因表达,说明Nb基因的表达受到组蛋白去乙酰化方式的调控。对家蚕微孢子虫uniqueEST的序列特征分析发现,Nb mRNA UTR的长度和GC含量与其它微孢子虫差异较小,但ORF区的AT含量较高,即家蚕微孢子虫基因ORF序列较其它微孢子虫发生了高AT变化。Nb unique EST的功能注释及分类结果表明感染后第10天家蚕丝腺中的Nb孢子仍处于多形期,还未完全成熟化。