上西早生柿ETR5基因片段的克隆与植物表达载体的构建

编号 zgly0000532749

文献类型 期刊论文

文献题名 上西早生柿ETR5基因片段的克隆与植物表达载体的构建

作者 陈佳  马俊莲  张子德  唐霞 

作者单位 河北农业大学食品科技学院 

母体文献 华北农学报 

年卷期 2007,22(4)

页码 25-28

年份 2007 

分类号 S665.203 

关键词 柿  上西早生  乙烯受体  ETR5  植物表达载体 

文摘内容 从上西早生(Uenishiwase)柿叶片中，提取了基因组DNA。以基因组DNA为模板，经PCR扩增，克隆到一个549bp的ETR5的DNA片段。序列分析表明，上西早生柿基因与洋梨ETR5的核苷酸同源性为79．0％，氨基酸同源性为81．0％；并且含有其他植物ETR5的保守氨基酸区和不变氨基酸残基，表明克隆到的序列是上西早生柿ETR5的基因片段。设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物，以测序质粒为模板，PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase片段。2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断。连接片断经双酶切消化后，连接到植物表达载体pBI221上，构建成Uenishiwase-ETR5基因的植物表达载体。