烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白ⅡcDNA的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

编号 zgly0001298793

文献类型 期刊论文

文献题名 烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白ⅡcDNA的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

作者 巩中军  原国辉  郭线茹  安世恒 

作者单位 河南农业大学植物保护学院  浙江大学应用昆虫学研究所 郑州450002  郑州450002  杭州310029 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2005年01期

年份 2005 

分类号 S433 

关键词 烟实夜蛾  普通气味结合蛋白  触角  基因克隆  原核表达 

文摘内容 利用RT PCR技术扩增了编码烟实夜蛾Helicoverpaassulta雌、雄虫触角普通气味结合蛋白Ⅱ的cDNA片段 ,将其克隆至pGEM TEasy载体 ,获得了普通气味结合蛋白Ⅱ基因成熟蛋白阅读框序列。将该基因重组到表达型质粒pET 30a(+)中 ,并转化入原核细胞中表达。序列测定结果表明 ,烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白基因的成熟蛋白阅读框全长 4 89bp ,编码 16 2个氨基酸残基 ,预测分子量和等电点分别为 18 2kD和 5 35。推导的氨基酸序列与已报道的 10种昆虫普通气味结合蛋白Ⅱ高度同源 (73%～ 98% ) ,并具有气味结合蛋白的典型特征。SDS PAGE和Western印迹分析表明 ,经IPTG诱导 ,普通气味结合蛋白Ⅱ基因能在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达 ,电泳检测到一条约 2 3kD大小的外源蛋白 ,与预测的融合蛋白分子量大小相应。