马蔺VP基因的克隆与植物表达载体构建

编号 zgly0001528779

文献类型 期刊论文

文献题名 马蔺VP基因的克隆与植物表达载体构建

作者 郭静雅  李杉杉  郭强  毛培春  田小霞  孟林  杨晓盆 

作者单位 北京市农林科学院北京草业与环境研究发展中心  山西农业大学 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年12期

年份 2016 

分类号 Q943.2  S682.19 

关键词 马蔺  H+-PPase基因  序列分析  重组质粒  遗传转化 

文摘内容 以马蔺幼根总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增得到马蔺H+-PPase全长序列并克隆到p MD19-T载体,命名为Il VP。序列分析表明该基因的开放阅读框为2 316 bp,编码771个氨基酸,推测等电点为5.16,分子量为80.7 k D,所得到的序列与Gen Bank中注册的高等植物液泡膜H+-PPase的核苷酸序列相比,其同源性均达到70%以上,其氨基酸序列的同源性则达到79%以上。用SmaⅠ和SacⅠ分别对目的基因质粒和植物表达载体p BI121进行双酶切,在DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物重组质粒p BI121-35S-Il VP-Nos,再转入根癌农杆菌EHA105中,为该基因在烟草等植物中遗传转化和基因功能研究奠定基础。