低分子量尿激酶与Annexin V的融合基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

编号 zgly0001265929

文献类型 期刊论文

文献题名 低分子量尿激酶与Annexin V的融合基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

作者 王丽鸳  金勇丰  朱成钢  张耀洲 

作者单位 浙江大学生物化学研究所  浙江大学生物化学研究所 杭州310029  杭州310029  杭州310029 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2003年03期

年份 2003 

分类号 Q78 

关键词 低分子量尿激酶  膜联蛋白V  家蚕杆状病毒载体表达系统  溶栓与抗栓功能 

文摘内容 将低分子量尿激酶与膜联蛋白 (AnnexinV)的融合基因重组到家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中 ,获得重组转移载体pBacPAK UKAV ,并与线性化的病毒Bm PAK6DNA共转染家蚕细胞 ,获得重组病毒BacPAK UKAV。将重组病毒BacPAK UKAV感染家蚕培养细胞 (MOI=10 )和 5龄幼虫 (10 5pfu/头 ) ,Western印迹方法表明表达产物大小约为 6 9kD。用纤维蛋白平板溶圈法测定表达产物的纤溶活性 ,其融合蛋白具有明显的纤溶活性 ,约为 5× 10 -5U/个细胞。用APTT法测定表达产物的抗凝活性 ,比野生病毒Bm PAK6感染表达产物的APTT时间延长了 1倍以上 ,表现出明显的抗凝活性。体外实验表明 ,家蚕培养细胞和幼虫表达的重组低分子量尿激酶与AnnexinV融合蛋白具有溶栓与抗栓双功能。研究结果为今后进一步探索具有溶栓抗栓功能的血栓药物提供了新的方向。